في السنوات الماضية ، استخدمت Coriell كل المصل المعطل بالحرارة لمزارع خلاياها لتعطيل البروتين التكميلي الموجود في مصل العجل حديثي الولادة. نظرًا لأننا تغيرنا إلى مصل بقري جنيني ، وجدنا أن تعطيل الحرارةليس ضروريًالمعظم خطوط الخلايا.
كم من الوقت تقوم بتسخين تعطيل FBS؟
يقترح البروتوكول التالي لتثبيط حرارة مصل الأبقار الجنيني (FBS). يتم تسخين FBS إلى 56 ± 2 درجة مئوية لمدة30 ± 2 دقيقةفي حمام مائي مهيج. تعطيل الحرارة (HI) - عملية يتم من خلالها الحفاظ على FBS عند درجة حرارة 56 ± 2 درجة لمدة 30 ± 2 دقيقة.
لماذا يعتبر التعطيل الحراري ضروريًا لـ FBS قبل الاستخدام؟
العلاج الشائع لـ FBS هو تعطيل الحرارة ، حيث يتم تسخين FBS عند 56 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة في حمام مائي مع الاهتزاز العرضي. الغرض هوتعطيل أي مكونات للنظام التكميلي موجودة في FBS[24] ، ومثبطات أخرى غير معروفة محتملة لنمو الخلايا.
لماذا تحتاجين إلى تسخين المصل المعطل؟
الهدف من تعطيل الحرارة هوتدمير النشاط التكميلي في المصل دون التأثير على خصائص تعزيز النمو للمنتج. إزالة النشاط التكميلي من المصل ليس مطلوبًا لمعظم مزارع الخلايا ، ولكن قد يكون ضروريًا للثقافات الحساسة للنشاط التكميلي.
كيف تخزن الحرارة المعطلة FBS؟
حماية FBS المذابة والأمصال الأخرى مع التبريد الآمن وتخزين. استخدم المصل المذاب على الفور. قد يتم تخزين السائل FBS والمصل الآخر في الثلاجة (من 2 إلى 8 درجات مئوية)حتى أربعة أسابيع.
