التربسين هو عملية تفكك الخلية باستخدام التربسين ، وهو إنزيم محلل للبروتين الذي يكسر البروتينات ، لفصل الخلايا الملتصقة عن الوعاء الذي يتم استزراعها فيه. عند إضافته إلى مزرعة خلوية ، يقوم التربسين بتفكيك البروتينات التي تمكن الخلايا من الالتصاق بالوعاء.
لماذا نقوم بتجربة الخلايا؟
غالبًا ما يتم إجراء التربسين من أجلللسماح بمرور الخلايا إلى حاوية جديدة، أو الملاحظة للتجربة ، أو تقليل درجة الالتحام في القارورة عن طريق إزالة نسبة مئوية من الخلايا.
كيف يعمل التربسين لفصل الخلايا؟
التربسين / EDTA هي طريقة مشتركة لفصل الخلايا. يقطع التربسينبروتينات الالتصاق في تفاعلات الخلية الخلوية والمصفوفة الخلوية عن طريق قطع الأحماض الأمينية لبروتينات الالتصاق على وجه التحديد في ليسين أو أجينين على الطرف C إذا كان الحمض الأميني المنبعليس برولين.
كيف تحصل على خلايا ملتصقة مجربة؟
الإجراء
- إزالة الوسيط من وعاء الاستزراع عن طريق الشفط وغسل الطبقة الأحادية بمحلول ملح خالي من Ca2+و Mg2+لإزالة كل آثار المصل. …
- الاستغناء عن محلول التربسين أو التربسين / EDTA في وعاء (أوعية) الثقافة لتغطية الطبقة الأحادية من الخلايا بالكامل ووضعها في حاضنة 37 درجة مئوية لمدة دقيقتين تقريبًا.
كيف يمكنني تعطيل التربسين في ثقافة الخلية؟
بمجرد ظهور الخلايا منفصلة ، أضف مجلدينمن وسائط النمو الكاملة المُجهزة مسبقًا لإلغاء تنشيطالتربسين. قم بتفريق الوسط برفق عن طريق التنصت فوق سطح طبقة الخلية عدة مرات لضمان استعادة >95٪ من الخلايا. بالنسبة للمزارع الخالية من المصل ، مثبط التربسين بفول الصويا (رقم المنتج
